高效液相色谱仪有什么特点 高效液相色谱仪原理是什么

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摘要:1960年代,由于气相色谱对高沸点有机物分析的局限性,为了分离蛋白质、核酸等不易气化的大分子物质,气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1960年代末科克兰(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪,开启了高效液相色谱的时代。接下来本文将简单介绍高效液相色谱仪有什么特点以及高效液相色谱仪原理是什么,一起到文中来看看吧!

一、高效液相色谱仪有什么特点

高效液相色谱仪的显著特征是高压、高速、高效、高灵敏度、高选择性和应用范围广等。

1、高压

高效液相色谱仪为了获得高柱效,使用的固定相粒径很小(<10um),液体流动相高速通过时,产生很高的压力,工作压力范围为1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用了高压,流动相流速快,所需的分析时间比经典液相柱色谱仪少得多。

3、高效

高效液相色谱仪的柱效能约3万塔板/米,气相色谱仪的柱效能约2000塔板/米。

4、高灵敏度

由于采用了高灵敏度的检测器,最小检测量可达10-9g,甚至10-11g,而所需样品量很少。

5、高选择性

可以通过控制流动相改善分离过程的选择性。

6、应用范围广

高效液相色谱仪可用于高沸点、热稳定性差以及具有生理活性物质的分析。一般来说,沸点在450℃以下,相对分子质量小于450的有机物可用气相色谱仪分析,但这些物质只占有机物的15%~20%,其余的80%~85%有机物原则上可采用高效液相色谱仪分析。

二、高效液相色谱仪原理是什么

高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中做相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。

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