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液相色谱仪操作流程是什么 液相色谱仪操作注意事项有哪些

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摘要:液相色谱仪引入了气相色谱仪的理论,技术上采用了高压输液泵、高效固定相、梯度洗脱技术和高灵敏度检测器,具有高压、高速、高效、高灵敏度、高选择性和应用范围广等特点。接下来本文将简单介绍液相色谱仪操作流程是什么以及液相色谱仪操作注意事项有哪些,一起到文中来看看吧!

一、液相色谱仪操作流程是什么  

生活中液相色谱仪并不常见,液相色谱仪是利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。那么液相色谱仪操作流程是什么呢?一起来看看吧!

首先先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。然后对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。一般情况下,流动相冲洗20-30分钟后,仪器方可稳定,最重要的是仪器基线走后,方可进样测试。

二、液相色谱仪操作注意事项有哪些

1、流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质。

2、流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。

3、不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。

4、使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然后用甲醇冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗。

5、长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相,因为纯水易长霉。

6、每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。

7、C18柱绝对不能进蛋白样品,血样、生物样品。

8、堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。

9、气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。

10、如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液:通常在输液前要进行流动相的清洗。

11、要注意柱子的pH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。

12、更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗,然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。

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