apoe基因检测是什么意思 APOE基因检测的意义

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摘要:基因检测的种类众多,在面向消费者的DTC基因检测中,APOE基因检测是比较常见的一种,它是检测人体称载脂蛋白E基因的,通过对载脂蛋白e基因的检测,可将患者分为E2、E3、E4三个表现型,每个表现型在不同的疾病的发生率上都有不同的特点。APOE基因检测的方法一般有三种,分别是等电聚焦法、双相电泳法和免疫印迹法。下面一起来了解一下apoe基因检测是什么意思吧。

一、apoe基因检测是什么意思

APOE基因检测,又称载脂蛋白E基因检测,APOE是apolipoprotein E的缩写,翻译过来就是载脂蛋白E,它是一种多态性蛋白,参与脂蛋白的转化与代谢过程,其基因可以调节许多生物学功能,与许多眼科疾病发病有关,对ApoE及其基因多态性的研究是医学研究的热点之一,探讨两者之间的内在联系,对眼病的预防、诊断及治疗具有重要的临床应用价值。

二、APOE基因检测的意义

在临床上通过APOE基因检测主要是针对于载脂蛋白e基因的检测,一般可将患者分为E2、E3、E4三个表现型,每个表现型在不同的疾病的发生率上都有不同的特点。

我国大多数人群属于E3表现型,属于相对较为均衡的类型。E4表现型患者出现动脉粥样硬化、冠状动脉粥样硬化性心脏病和痴呆的风险相对比较低,黄斑变性导致视力损害的可能性相对较高。E2表现型患者几乎不太可能出现黄斑变性,但是出现痴呆和冠心病的风险相对反而过高。

三、APOE基因检测的方法

APOE基因检测既可以以VLDL为样品,又可以直接以血清(或血浆)为样品,通过IEF电泳分析、双向PAGE或结合免疫印迹法进行测定:

1、等电聚焦法(IEF)

由于三种主要ApoE异构体E2、E3和E4的等电点(pⅠ)分别为5.89、6.02和6.68,E4比E3多一个正电荷,而E2比E3少一个正电荷。因此,可应用1EF检测这些异构体间电荷差异而确定不同ApoE表型。传统ApoE表型检测方法多采用超速离心法或化学沉淀法分离VLDL,脱脂后进行IEF,然后进行染色分析。这种方法需要血清量较多,昂贵、费时,又需要大型设备,不适合大规模研究。ApoE异构体之间染色程度之间差异及电泳过程中泳动距离的变异性也造成结果的不稳定性。

2、双相电泳法(two-dimensional electrophoresis)

第一相应用IEF电泳将等电点不同的蛋白质分离;第二相根据蛋白质分子量不同及浓度的差异,应用SDS-PAGE进行分离,由此确定ApoE表型。此技术能解决IEF遇到的一些转录后修饰的问题,临床标本用量也很少,并且可以同时进行定性和定量分析,但由于成本昂贵而且费时,有时也难以清晰地分辨表型,故临床上应用较少。

3、免疫印迹法(immunoblotting)

血清脱脂后,经IEF电泳将ApoE与其他蛋白质分离,然后将凝胶中蛋白质转移到硝酸纤维素(NC)膜上,用抗ApoE抗体作为一抗进行免疫印迹反应或采用直接的免疫固定法,即可灵敏而特异地显示出ApoE区带的位置,从而确定ApoE表型。此方法利用抗原-抗体的特异反应,排除了血清其他蛋白质的干扰,不需超速离心分离VLDL,血清用量少,是国内外实验室检测ApoE表型常用的方法之一。但此类方法亦存在一些缺点,如对于存在与普遍异构体具有相同电荷的罕见异构体标本,或在糖尿病等病理状态时,由于转录后修饰引起蛋白质变化的标本检测时,就会给出错误的结果。

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