食用菌栽培技术食用菌种植 三种微生物的培养方法介绍

食用菌栽培技术食用菌种植 三种微生物的培养方法介绍

食用菌栽培技术有哪三种基本方法

微生物的培养方法有三种，即纯培养法、选择性培养法和优势培养法。

一、 菌种制作的基本设备

1、 食用菌菌种制作的工艺流程：培养料的贮备和预处理-------容器、工具的洗涤------配料、培养基制作------灭菌------冷却------接种------培养-------贮存

2、 基本设施：①厂房、②原料库、③原料预处理场地、④洗涤室、⑤配料室、⑥灭菌室、⑦接种室、⑧化验室、⑨培养室、⑩贮存室

二、 纯种分离

菌种的分离方法主要有：孢子分离法、组织分离法、基内菌丝分离法和土中菌丝分离法。

1、 孢子分离法：属有性繁殖。对于香菇、平菇异宗结合的菇类，为避免产生单孢不孕现象，必须采用多孢分离法。单孢分离法主要用于杂交育种的研究。

（1）种菇的选择和处理

种菇选择的标准：必须纯正，具有本菌株性状，发育健壮，无病虫害，成熟度适当。种菇选定后，首先除去附着在菇体表面的杂物，如蘑菇、草菇可用0.1%升汞浸泡消毒2-3分钟，然后用无菌水漂洗3次，以洗除表面附着的药物，最后用无菌纱布吸干水分。香菇、平菇可用75%酒精进行表面消毒。

（2）多孢分离法

①整菇播种法、②钩悬法、③贴附法、④菌褶上抹取孢子法、⑤孢子印分离法、⑥空中孢子捕捉法

（3）单孢子分离法

一般采用方法：平板稀释法、连续稀释法、毛细管法等。

2、组织分离法

（1） 子实体分离法

（2） 菌核分离法

（3） 菌索分离法：对一些不易找到子实体及菌核的菌类

3、基内菌丝分离法

对于子实体只有在特定的季节下出现，平时不易采到，或子实体小而薄或呈胶质状态

（1）菇木（或耳木）分离法在食用菌繁殖旺盛期

（2）代料基质分离法

分离前，选择一批子实体发生早、产量高、菇体尚幼嫩且生活力强而无病虫害的栽培袋，待子实体将近成熟时，去掉子实体，然后用75%酒精将培养袋进行消毒后，在培养料下1.5cm处挑取0.3cm的培养料小方块组织，接入试管培养基的中央，置于恒温下培养。

3、 土中菌丝分离法：用于采集生长在土中的菇类菌丝体

三、制种技术

采用孢子分离、组织分离和基内菌丝分离等方法分离培养而获得的纯菌丝，经过原种的扩大培养和母种、栽培种的制作，即可作为食用菌生产用的菌种。

1、菌种的类型母种、原种、生产种

2、培养基的种类天然培养基、合成培养基、半合成培养基

3、原种制作从担孢子或菇体组织直接分离培养获得的原种或引进的原种

4、 母种及生产种制作将原种菌丝体移植到由粪、草、木屑、棉籽壳或麦粒等原料配制成的培养基上，而制成的菌种称母种。将母种再扩大繁殖制成的菌种，称栽培种或生产种。

5、培养基灭菌

（1）高压蒸汽灭菌法琼脂培养基采用1.05kg/cm2压力，温度121℃，灭菌45-60分钟；母种和栽培种固体培养基采用1.2-1.5kg/cm2压力，温度123-129℃，灭菌1-1.5小时。

（2）常压蒸汽灭菌

6、接种室消毒灭菌

熏蒸消毒法：甲醛与高锰酸钾混合熏蒸法

（2）紫外线消毒：

（3）石碳酸灭菌

7、接种：在无菌条件下，将原种或母种菌种移接到经过严格灭菌的培养基上，称为接种。

8、菌种培养

（1）原种培养

接种后的试管原种，置于25℃左右的恒温箱中培养，经过2-3天即可检查生长情况，纯洁菌种经过7-15天的培养，原种菌丝即可长满斜面培养基。

（2）母种及栽培种培养

栽培种接种后置于25℃左右的培养室内培养。当菌种瓶中菌丝体伸入培养基的1/3时，培养室内的温度可降低2-3℃，以避免菌丝生长代谢加强，料温上升而引起高温障碍。培养室内保持60-70%的空气相对湿度。一般经过20-40天的培养，菌丝即可扩散生长到整个培养基，再经过7-10天即可培养出优质的菌种。

四、菌种保藏方法及复壮技术

1、菌种保藏方法菌种保藏的基本手段是采用低温、冷冻、干燥、减少供氧量等方法，终止其繁殖，降低其代谢强度，使之处于休眠状态。

（1） 斜面低温保藏法：保藏时间不长。

（2） 液体石蜡保藏法：保藏期限可达3-5年。

（3） 滤纸保藏法：保藏期限可达2-5年。

（4）真空冷冻干燥保藏法：保存时间可达数年

（5）液态氮超低温保藏法：近年国际流行的新技术。

2、菌种复壮技术提纯复壮。主要有组织分离法及菌丝体复壮的方法。